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實驗的失誤常常是“低級錯誤”,說出來不值一哂,可就是會發(fā)生在我們這些博士碩士“高級知識分子”身上,尤其是生手,大家都來曬一曬,都發(fā)生過什么低級錯誤,也讓后來者借鑒,讓旁觀者一笑。
1、前半年提了數(shù)百例的DNA,當(dāng)時條件差,完全靠自己摸索,DNA跑了、丟了都遇到過,還有一次,最后發(fā)現(xiàn)辛辛苦苦提出的DNA里居然不知什么時候鉆進(jìn)了一只蚊子,忍痛棄之。
2、記得第一次配電泳緩沖液TBE,看《分子克隆》上寫的加入tris,硼酸以及EDTA,加水定容至100ml,在將這個配方抄寫到實驗記錄本時壓根就沒注意是100ml直接就寫成了1000ml(以前配溶液一般是配1000ml的,所以養(yǎng)成習(xí)慣了)。結(jié)果跑電泳的時候發(fā)現(xiàn)電流好低,一時之間不知道哪出問題了。后來翻記錄和書上一對,發(fā)現(xiàn)少了個0,只好重配。
3、剛開始提人血液中基因組DNA標(biāo)本,每次都很順利,提過多次后,70%的乙醇用完了,就新配了一瓶。結(jié)果DNA總是在最后一步洗滌的時候消失,原來把70%的乙醇配成70%的水了。忙了半天全部重新做。
4、我有一次和幾個同學(xué)搶PCR儀用,結(jié)果太著急了。東西沒放進(jìn)機(jī)器就開始P了。等我n個循環(huán)過后,我同學(xué)發(fā)現(xiàn)了。他們都笑話我,說我大唱:空城計。成了實驗室的經(jīng)典笑話了。
5、設(shè)置pcr程序的時候,總是不小心把30s設(shè)成30min,也不看運行時間就閃,然后一個半小時左右的時候準(zhǔn)備取出,才發(fā)現(xiàn)還要運行n個小時~~
6、第一次收集蛋白樣品,忘了放-80冰箱了,在室溫放了幾天.后來又放回去了!
7、換新的電泳槽時,沒看好正負(fù)極,把膠板放錯位置了 ,東西都跑到電泳液里了,重頭再來!
8、先說說別人的, 再說說自己的
1)細(xì)胞培養(yǎng)實驗, 我中午安排個師妹去準(zhǔn)備下復(fù)蘇細(xì)胞, 沒想到晚上她就告訴我復(fù)蘇好了, 我就奇怪了, 血清4度化凍怎么這么快? 原來她直接把血清從-20度丟到37度的水里化凍的, 結(jié)果復(fù)蘇的細(xì)胞一瓶也沒活。。。
2)師弟第一次用INVITROGEN的預(yù)制膠,他告訴我說電流上不去, 我去看了下, 要他把電壓加大, 結(jié)果兩邊就冒火花!嚇?biāo)廊肆耍?于是我把電泳拆開, 發(fā)現(xiàn)預(yù)制膠的下槽的封口膠他沒撕, 等于是絕緣的。。。自然電流上不去了
3)最后一個是我自己的, 在洗2D-GEL玻璃的時候給準(zhǔn)備做畢業(yè)論文的本科生講解, 然后我說, 洗玻璃的時候要特別注意哦! 一不小心就容易打爛, 幾百塊一塊呢, 結(jié)果說著不小心玻璃在水龍頭上一碰, 掉池子里砸碎了。。。當(dāng)時那個安靜啊, 那些本科生都看著我, 一臉的同情。。。(從此以后把實驗室的水池全部鋪上了橡膠皮,防止打爛東西。。。。)
9、自已將酶切好的PCR底物電泳,電泳儀打開了,然后忙其它的事去了,N小時后跑回來,發(fā)現(xiàn)電泳時間太長,帶條跑“過”了。后來就把一個小鬧鐘帶在身上。做實驗看來就是專心啊,我是屬于忘事佬一族的。
10、一次灌膠把膠從微波爐里拿出來后就放那和一個同學(xué)聊起天來了,結(jié)果想起來的時候膠已經(jīng)在錐形瓶里凝固的很結(jié)實了。
一次做PCR忘了蓋PCR儀的蓋子了,結(jié)果啥都沒跑出來。
再說一個別人的
我配的50XTAET被人當(dāng)無水乙醇用了……
11、有一年我用SD大鼠做實驗,應(yīng)該雌雄配對,分開飼養(yǎng)灌胃用藥,結(jié)果實驗員疏忽,把一只雌鼠放到雄鼠籠子里,結(jié)果可想而知,一段時間后發(fā)現(xiàn)雌鼠體重迅速增加,體形改變,才真相大白,可惜浪費了許多時間!后來每次做實驗,在分鼠時,我們都注意了!
12、我也來說說:
1)最郁悶的一次是導(dǎo)師出國前親自教我提取RNA,結(jié)果離心后一點沉淀也沒有,仔細(xì)分析原因,發(fā)現(xiàn)我把離心機(jī)12000rpm設(shè)成了1200rpm,導(dǎo)師一上午的時間就被我白白浪費了,當(dāng)時那個無地自容啊,但是偶導(dǎo)師還寬慰我,說不犯錯誤也不好,這樣以后就得注意了
2)偶師兄初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),無菌操作時仔細(xì)的將手套,鑷子用酒精全部擦了一遍,一個死角都沒留,擦完之后覺得時候覺得濕濕的,就往酒精燈上考鑷子,結(jié)果可想而知,鑷子,手套成了火龍啊,還好還好沒受傷
13、曬曬俺們實驗室同志們犯的“低級錯誤”
1)純水儀里加工業(yè)酒精(酒精和蒸餾水聞聞味道也能區(qū)分開?。?
2)急著去吃飯,忘了滅超凈臺里的酒精燈,酒精燈燒干了,被老板罵了一頓!
3)做PCR時引物1加了兩次,引物2沒加;
4)加不同的液體不換槍頭,造成交叉污染;
5)小鼠麻醉時加20ul麻醉劑,結(jié)果注入了200ul,可憐的鼠鼠當(dāng)場眼睛就發(fā)白了!
6)凍存的細(xì)胞一直在4度放著!
14、做WESTERN犯了好多低級錯誤,回想起來有:
1)跑電泳時,正負(fù)極接反,溴芬蘭跑出去了
2)點樣時居然把DNA的MARKER當(dāng)?shù)鞍譓ARKER點了上去,跑了很久才發(fā) 現(xiàn)MARKER還是沒有分開,....
3)轉(zhuǎn)膜時切膠,切歪,把蛋白切掉了,555555
對策:
1)每次跑電泳,轉(zhuǎn)膜都看清電極后接電源
2)每次點樣都看清楚再點
3)轉(zhuǎn)膜時切膠盡量切大些,寧愿多做一次,浪費點膜,也不要將膠切成很多小塊,一次做多種抗體
15、提基因組弄了一下午,最后收集的時候編號錯了,全白費了?。?!
16、我的低級失誤就更夸張了??!
PCR,試劑沒有問題,問題在我放進(jìn)機(jī)器之后居然沒有蓋蓋子,都不知道當(dāng)時哪根筋出了問題,知道后來有人在實驗室大喊:。。。。。。
17、說說我的糗事吧,剛開始做實驗,不是很懂,看過師兄做過一次PCR,跑過一次電泳,然后自己做,師兄在旁知道,加完樣,跑完P(guān)CR,很順利,正準(zhǔn)備跑電泳的時候,師兄手機(jī)響了,是老板急召,他問我會不會跑電泳,我因看過一次,自己很有信心的說會,師兄于是放心的走了,結(jié)果30分鐘后師兄回來了,我問師兄怎么除了marker有條帶,PCR樣都沒條帶,是不是PCR不好阿,師兄想不對阿,昨天他還能做出來的,今天怎么就做不出來了,于是就問我電泳怎么跑的,我就指了指一旁的Buffer,就是把PCR產(chǎn)物和Buffer混勻了加到電泳槽里跑個30分鐘,師兄一看暈倒,我加的是跑PCR用的Buffer,而不是跑電泳用的loading Buffer,難怪跑不出來!剛開始做實驗,迫切的想上手,但是似懂非懂,做錯不少事情
18、用試劑盒抽提質(zhì)粒,前面都需要離心,棄液,離心,棄液,最后一步ellotion buffer溶DNA,離心后,俺把收集的質(zhì)粒繼續(xù)棄去,然后……
19、我做免疫組化的時候,在多次洗脫后,加抗體之前不是要把組織玻片背面的水用衛(wèi)生紙擦干嘛,同學(xué)催著我下班吃飯,一急一大意就擦反了,狂暈,我寶貴的組織啊,擦得剩下一丁點了。糾結(jié)啊,郁悶啊,不得已,切片來源很珍貴,也勉強(qiáng)做完了,幸好還能看見寶貴的陽性表達(dá)